jueves, 7 de mayo de 2015

GIEMSA PARA CORTES

 Primero desparafinamos:
 Ponemos las secciones en la estufa 10 min a 60ºC o toda la noche a 37ºC, sumergir los portas en xilol  u otro disolvente de la parafina en concentraciones decrecientes.

Hidratación:
 Eliminar el xilol mediante un disolvente adecuado como el etanol en concentraciones decrecientes hasta el 0% (agua), sumergir en agua destilada (o de grifo) para que la muestra se hidrate, ya que la mayoría de los tintes tienen una base acuosa.

Tinción:
1-      Sumergir las muestras en una solución de Giemsa (filtrada y comercial, o al 30% en agua destilada) durante 1 hora, a Tª ambiente.
2-       Se lava con agua hasta que rebose
3-       Lavar con agua acética al 2% varias veces rápidamente, aunque puede llegar hasta 30 segundos (diferenciación)
4-       Se lava con agua corriente hasta que rebose
5-       Deshidratar con alcohol isopropílico (propanol)  (2 cambios al menos) (No usar etanol)
6-      Se sumerge en las distintas cubetas de xilol durante 5 minutos cada una.
7-       Tras este proceso, ya se puede montar.

Resultados:
                     
                        Eritrocitos……………………………….. Rojo ladrillo
                        Núcleos celulares……............................... morado
Granulaciones especificas……….. ............Rojo, rosa o morado
Citoplasmas…………………………….. ..Del rosa al azul (efecto giemsa)
Hueso……………………………………...azul
Bacterias y parásitos……………azul, (menos las rikettsias que se ven violetas)



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