PAPANICOLAU

 
 

Utilizaremos las células de las muestras obtenidas en citologias a las cuales se les reliza un proceso de  centrifugación.

Las fijamos con etanol al 96⁰ durante 15-30 minutos y procedemos con la tinción.

PROCEDIMIENTO:

             

1.      Hidratación: Pasamos las muestras por los etanoles a concentraciones decrecientes (96⁰, 80⁰, 70⁰, 50⁰) 1 minuto en cada uno.

2.       1 minuto en el coplin con agua

3.       1-2 en la hematoxilina de Harris (según su maduración)

4.       Lavamos en agua 2 min

5.       Diferenciamos con alcohol clorhídrico 5 segundos.

6.       Neutralizar con carbonato de Litio 45 segundos (nosotros utilizaremos agua del grifo)

7.       Lavamos con agua

8.       Deshidratamos con etanoles a concentraciones crecientes (50⁰, 70⁰, 80⁰, 96⁰)

9.       Orange G de 3-6 minutos

10.   Etanol 96⁰ dos pases de 1 min

11.   EA 50⁰ o 60⁰ de 3-6 minutos

12.   Etanol 96⁰ dos pases de 1 minuto

13.   Xilol dos pases de 1 minuto en cada etanol

14.   Montar con Eukit®

RESULTADO:

Núcleos ------------------------azul oscuro

Núcleos con queratina-------naranja

Nucléolos y citoplasmas-----rosa/rojo