TÉCNICA DEL PAS

PROCEDIMIENTO TÉCNICO:

 Fijación:

Formol al 4 % o Líquido de Carnoy o Bouin.

Reactivos:

 - Ácido Periódico……………0.5 % p/v.

 - Reactivo de Schiff: o Fucsina básica (CI: 42510)………… 1g.

 -Agua destilada……………………... 200 ml.

- Disolver la fucsina en 200 ml de agua destilada hirviendo.

- Dejar enfriar hasta aproximadamente 50º C. y filtrar

- Posteriormente agregar 20 ml de HCl 1N. Después enfriar hasta 25º C y añadir 1g de     Bisulfito sódico o Metabisulfito potásico (sódico).

- Mantener en la oscuridad. El liquido tarda unos 2 días o a veces 24h en tornarse de color amarillo que indica que está listo para su uso.

- Añadir 2g de carbón activado, mezclar y filtrar hasta que desaparezca el color.
La solución debe conservarse en el refrigerador protegido de la luz.

- Solución de agua sulfurosa: o Baño de Ácido Sulfuroso o Agua sulfurosa: o Ácido Clorhídrico (HCl) 1N…………… 5 ml. o Metabisulfito sódico 10 %……………... 6 ml. o Agua (d)………………………………... 100 ml.

 - Colorante de contraste: Hematoxilina, Orange G o Van Gieson.

 -  Técnica de Tinción:

-Desparafinar e hidratar (xilol y decrecientes alcoholes)

-Ácido periódico 0.5 %…………………………………… 5 min.

- Lavar en agua destilada  Reactivo de Schiff……………………………………….. 15- 30 min.

- Aclarar en 3 baños de agua sulfurosa…………………… 2 min. Cada uno.

- Lavar en agua corriente

- Colorante de contraste

- Lavar con agua corriente.

- Deshidratar, aclarar y montar.

RESULTADO:
Material PAS +: rojo oscuro a magenta