1º- Lo primero que debemos hacer antes de comenzar es filtrar la
Hematoxilina, una vez filtrada procedemos a la tinción.
2º- El proceso empieza desparafinando en la estufa (37° overnight
o 10 minutos en la estufa a 60°).
3º- Cogemos la muestra y
la introducimos de 5-10 minutos en Xilol para desparafinar, descubrimos y
repetimos el proceso en el segundo Xilol y nuevamente en el tercero, lo sacamos
y lo secamos un
poco.
poco.
4º- Procedemos a hidratar la muestra pasándola por al menos 5-6
pasos de Etanol a concentración decreciente ( 100°,96°,80°…) de 3-5 minutos en
cada uno.
5º- Lo pasamos por agua y agitamos hasta que no veamos “marcas”,
y escurrimos.
6º- Seguidamente metemos la muestra en la Hematoxilina
previamente filtrada y nos llevamos el coplin a la pila a esperar de 3-5
minutos.
7º- Lo metemos en otro coplin con agua donde lo aclaramos
dejando correr el agua.
8- Metemos y sacamos rápido la muestra en el alcohol
clorhídrico (diferenciar) para eliminar el
exceso de coloración y un paso
rápido en agua corriente.
9- Lo metemos en Eosina de 3-5 minutos, lo descubrimos y le
damos una pasada rápida por agua corriente.
10- Ahora procedemos a la deshidratación con alcoholes a
concentraciones crecientes (…,70°,80°,96°,100°) rápidamente y dejándolo en el
último Etanol unos 5 minutos.
Finalmente pasamos a los Xiloles rápidos y lo dejamos 5
minutos en el último.
RESULTADOS:
RESULTADOS:
Los núcleos,
se tiñen de color azul con la hematoxilina
La eosina tiñe
de rosa más o menos intenso estructuras acidófilas (las fibras de
colágeno.)
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