Un microtomo es una herramienta que se utiliza para la obtención de finas láminas de material denominadas SECCIONES permitiendo su posterior observación en microscopios de luz transmitida o de radiación de electrones.
Dependiendo del tipo de material, de su fisiología y de su composición utilizaremos cuchillas de acero, vidrio o diamante; se debe tomar demasiada precaución debido a que la cuchilla tiene demasiado filo.
Las medidas de sección de corte habituales en la microtomía son de 1 a 50 micras, pero varían según el tipo de muestra y según el microscopio en el que se desee observar la muestra.
Dependiendo del tipo de material, de su fisiología y de su composición utilizaremos cuchillas de acero, vidrio o diamante; se debe tomar demasiada precaución debido a que la cuchilla tiene demasiado filo.
Las medidas de sección de corte habituales en la microtomía son de 1 a 50 micras, pero varían según el tipo de muestra y según el microscopio en el que se desee observar la muestra.
Para proceder al corte debemos tener:
- Palangana de hielo
- Cubeta con agua fría
- Baño de agua caliente (50ºC)
- Pinzas
- 2 pinceles
- Punzón
- Brocha
- Portaobjetos
- Bloque de muestra
PROCEDIMIENTO DE CORTE:
Antes de poder proceder a realizar el corte la biopsia debe ser sometida a un proceso en el que es infiltrada en parafina para poder intensificar el endurecimiento, también debe confeccionarse el bloque.
Finalmente procederemos al corte por medio del microtomo.
Primeramente debemos fijarnos en que todos los ángulos (10º) y posiciones estén en su sitio, también debemos fijarnos en lo cercana que se encentra la cuchilla y ajustarla adecuadamente para no ocasionar daños a la muestra. (Acercaremos manualmente hasta que se observe una distancia prudencial y continuaremos acercándonos con el rotador milimétrico que podemos encontrar en el microtomo)
*La muestra debe estar constantemente fría y cada vez que dejemos de hacer uso del microtomo bloquear el rotor y observar que todo se encentre ajustado adecuadamente.
Devastaremos el bloque de parafina con un grosor de 20 a 15 micras; cuando la superficie esta lisa, continuaremos devastando con 5 o 6 micras durante unas cuantas rotaciones de más, luego se pone a enfriar el bloque para que sea posible el posterior corte.
Una vez ha sido devastado el bloque procederemos a cortar las muestras que deseamos ver
en el microscopio, con ello utilizaremos las pinzas para poder coger las láminas de parafina y poder depositarlas en la cubeta de agua fría, ahí seleccionaremos las láminas optimas y las separamos del resto por medio del punzón.
En la cubeta de agua fría recogeremos la muestra con un portaobjetos para poder traspasarla al baño de agua caliente, y de este modo poder eliminar las posibles arrugas que se hayan originado durante el corte.
Deben recogerse las muestras nuevamente del baño de agua caliente con el portaobjetos con bastante cuidando y teniendo en cuenta el lado correcto del portaobjetos; este procedimiento se denomina “Pesca”.
Una vez hayamos finalizado el corte, limpiamos el portaobjetos por detrás y se le pone el nombre para poder identificarlo.
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